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ELISA操作步骤过程九要素

2019/9/30 4:04:26发布130次查看
elisa实验过程中,操作过程中有一些易被人们忽视小细节,但这些小细节却对实验效果会发作直接影响。以下是elisa控制操作过程的九点要素:
一、严格依照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
二、加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明过程严峻控制操作时间,避免孵育时间人为延伸,导致非特异性结合紧附于反响孔周围,难以清洗彻底。
三、封板温育时,各孔一定要封严,避免阳性标本的液体蒸腾,发作周边现象然后导致“花板”的出现。
四、用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(选择洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干:还要避免针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易发作拖带现象而导致“花板”的出现。
五、合理安排检测量,以免反响板过多造成洗板等候时间长。
六、加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。
七、显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的tmb显色剂不用。
八、加样时坚持显色剂不外流;a、b液应避免接触金属器械。加终止液时应避免发作气泡。
九、应保证酶标板清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的办法可以使“花板”降至极限。然后前进检测的特异性。并得到更精确、牢靠的实验效果。

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